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    高中生物選修三【專題1 基因工程】知識點總結(jié)
    高中 來源:網(wǎng)絡(luò) 編輯:小新 2018-05-14 15:24:01

      對于高中生來說,常常會出現(xiàn)學過的知識記不住,對知識體系搞不清的狀況!主要原因還是因為不會歸納總結(jié)知識點!本文,伊頓教育一對一輔導(dǎo)小編就幫助同學們歸納總結(jié)了高中生物選修三相關(guān)知識點,下面我們就一起來學習一下專題一的知識吧!!!

    高中生物選修三【專題1 基因工程】知識點總結(jié)

      專題1 基因工程

      基因工程:是指按照人們的愿望,進行嚴格的設(shè)計,通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因技術(shù),賦予生物以新的遺傳特性,創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品?;蚬こ淌窃贒NA分子水平上進行設(shè)計和施工的,又叫做DNA重組技術(shù)。

      (一)基因工程的基本工具

      1. “分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)

      (1)來源:主要是從原核生物中分離純化出來的。

      (2)功能:能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開,因此具有專一性。

      (3)結(jié)果:

      經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式:黏性末端和平末端。

      2. “分子縫合針”——DNA連接酶

      (1)兩種DNA連接酶(E·coliDNA連接酶和T4-DNA連接酶)的比較:

     ?、傧嗤c:都縫合磷酸二酯鍵。

     ?、趨^(qū)別:E·coliDNA連接酶來源于大腸桿菌,只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來;而T4DNA連接酶能縫合兩種末端,但連接平末端的之間的效率較低。

      (2)與DNA聚合酶作用的異同:

      DNA聚合酶只能將單個核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接兩個DNA片段的末端,形成磷酸二酯鍵。

       

    DNA連接酶

    DNA聚合酶

    不同點

    連接的DNA

    雙鏈

    單鏈

    模板

    不要模板

    要模板

    連接的對象

    2個DNA片段

    單個脫氧核苷酸加到已存在的單鏈DNA片段上

    相同點

    作用實質(zhì)

    形成磷酸二酯鍵

    化學本質(zhì)

    蛋白質(zhì)

      3. “分子運輸車”——載體

      (1)載體具備的條件:

      ①能在受體細胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存。

      ②具有一至多個限制酶切點,供外源DNA片段插入。

      ③具有標記基因,供重組DNA的鑒定和選擇。

      (2)較常用的載體是質(zhì)粒,它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨立于細菌染色體之外,并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。

      (3)其它載體:λ噬菌體的衍生物、動植物病毒。

      (二)基因工程的基本操作程序

      第一步:目的基因的獲取

      1. 目的基因是指: 編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因 。

      2. 原核基因采取直接分離獲得,真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法和化學合成法。#p#副標題#e#

      3. PCR技術(shù)擴增目的基因

      (1)PCR的含義:是一項在生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)。

      (2)目的:獲取大量的目的基因

      (3)原理:DNA雙鏈復(fù)制

      (4)過程:

      第一步:加熱至90~95℃DNA解鏈為單鏈;

      第二步:冷卻到55~60℃,引物與兩條單鏈DNA結(jié)合;

      第三步:加熱至70~75℃,熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始進行互補鏈的合成。

      (5)特點:指數(shù)(2^n)形式擴增

      第二步:基因表達載體的構(gòu)建()

      1. 目的:使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳至下一代,使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。

      2. 組成:目的基因+啟動子+終止子+標記基因

      (1)啟動子:是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位,能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,較終獲得所需的蛋白質(zhì)。

      (2)終止子:也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段 ,位于基因的尾端。

      (3)標記基因的作用:是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細胞篩選出來。常用的標記基因是抗生素基因。

      第三步:將目的基因?qū)胧荏w細胞

      1. 轉(zhuǎn)化的概念:是目的基因進入受體細胞內(nèi),并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程。

      2. 常用的轉(zhuǎn)化方法:

      將目的基因?qū)胫参锛毎翰捎幂^多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,其次還有基因槍法和花粉管通道法等。

      將目的基因?qū)雱游锛毎狠^常用的方法是顯微注射技術(shù)。方法的受體細胞多是受精卵。

      將目的基因?qū)胛⑸锛毎涸松镒鳛槭荏w細胞的原因是繁殖快、多為單細胞、遺傳物質(zhì)相對較少 ,較常用的原核細胞是大腸桿菌 ,其轉(zhuǎn)化方法是:

      先用Ca2+處理細胞,使其成為感受態(tài)細胞 ,再將重組表達載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合,在的溫度下促進感受態(tài)細胞吸收DNA分子,完成轉(zhuǎn)化過程。

      3. 重組細胞導(dǎo)入受體細胞后,篩選含有基因表達載體受體細胞的依據(jù)是標記基因是否表達。

      第四步:目的基因的檢測和表達

      1. 首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因,方法是采用DNA分子雜交(DNA-DNA)技術(shù)。

      2. 其次還要檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA,方法是采用分子雜交(DNA-RNA)技術(shù)。

      3. 較后檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì),方法是采用抗原—抗體雜交技術(shù)。

      4. 有時還需進行個體生物學水平的鑒定。如生物抗蟲或抗病的鑒定等。

      (三)基因工程的應(yīng)用

      1. 植物基因工程:抗蟲、抗病、抗逆轉(zhuǎn)基因植物,利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì)。

      2. 動物基因工程:增強動物生長速度、改善畜產(chǎn)品品質(zhì)、用轉(zhuǎn)基因動物生產(chǎn)藥物。

      3. 基因治療:把正常的外源基因?qū)氩∪梭w內(nèi),使該基因表達產(chǎn)物發(fā)揮作用。

      4. 基因診斷:又稱為DNA診斷,是采用基因檢測的方法來判斷患者是否出現(xiàn)了基因異?;驍y帶病原體。#p#副標題#e#

      (四)蛋白質(zhì)工程的概念

      蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ),通過基因修飾或基因合成,對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造,或制造一種新的蛋白質(zhì),以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。(基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì))

      蛋白質(zhì)工程的基本途徑:

      從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)

      設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)

      推測應(yīng)有的氨基酸序列

      找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列(基因)

      ★ 蛋白質(zhì)工程與基因工程區(qū)別

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    文章標簽: 生物
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